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方法一：建立Autorun.inf免疫文件。在U盘根目录下新建一个名为Autorun.inf的空文件，这样一来，在同一目录下病毒就无法创建Autorun.inf文件来感染U盘了。若U盘已经感染病毒，那么建立Autorun.inf免疫文件的方法就失效了。
方法二：禁用组策略中的自动播放
以Win7系统为例，其步骤是：点击"开始"→"运行"，输入gpedit.msc后回车，弹出组策略窗口，在其中依次选择"计算机配置"→"管理模板"→"系统"，打开"关闭自动播放"属性，点击已启用，在下拉菜单中选择“所有驱动器”，单击确定退出。
方法三：利用“控制面板”禁止自动播放功能。打开控制面板，依次进入“控制面板”-“所有控制面板项”-“自动播放”，取消勾选“为所有媒体和设备使用自动播放（U）”，最后点击“保存”按钮。
方法四：禁止注册表中MountPoints2的写入。依次点击"开始"→"运行"，输入regedit后回车，打开注册表编辑器，依次展开 “HKEY_CURRENT_USER Software Microsoft Windows CurrentVersionExplorerMountPoints2，右键点击MountPoints2键，选择权限，将 Administrators组和SYSTEM组的完全控制项都设为拒绝。
说明：禁止MountPoints2的写入是为了阻止Windows读取Autorun.inf后添加新的右键菜单项，从而阻止病毒菜单项的出现，使之无法激活病毒。
用资源管理器打开U盘内容。具体操作方法：按下键盘组合键“Win+ E”打开资源管理器，然后选择U盘盘符并打开，即可防止U盘中的Autorun.inf文件的运行，从而有效防止病毒文件的运行。